产品使用信息

为了获得最佳的 ChIP 和 ChIP-seq 结果，每次免疫沉淀使用 10 μl 抗体和 10 μg 染色质（大约 4 x 10⁶ 个细胞）。该抗体已使用 SimpleChIP^® Enzymatic Chromatin IP Kits 进行验证。

使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 测定 CUT&RUN 稀释度。

保存

保存在 10 mM sodium HEPES (pH 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA、50% 甘油和低于 0.02% 的叠氮化钠中。-20℃ 保存。切勿分装抗体。

实验步骤

  选择您的实验步骤   蛋白质印迹法  免疫组织化学（石蜡）  免疫荧光法（免疫细胞化学）  流式细胞术（固定/通透）  染色质免疫沉淀法  ChIP-seq  CUT&RUN 

特异性/灵敏度

Tri-Methyl-Histone H3 (Lys36) (D5A7) XP^® Rabbit mAb 可检测内源水平的仅在 Lys36 位点被三甲基化的组蛋白 H3。抗体不会与非甲基化、单甲基化或二甲基化的 Lys36 发生交叉反应。另外，抗体不会与 Lys4、Lys9、Lys27 位点甲基化的组蛋白 H3 或 Lys20 位点甲基化的组蛋白 H4 发生交叉反应。

物种反应性：

人, 小鼠, 大鼠, 猴

基于 100% 序列同源性预测发生反应的物种： 

仓鼠 , 鸡 , 黑腹果蝇 , 非洲爪蟾蜍, 斑马鱼 , 牛

来源/纯化

使用与 Lys36 三甲基化组蛋白 H3 氨基末端相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

核小体由四个核心组蛋白（H2A、H2B、H3 和 H4）组成，是染色质的主要组成部分。最初被认为可作为 DNA 包装的静态支架的组蛋白现在已被证明是动态蛋白，可进行多种类型的翻译后修饰，包括乙酰化、磷酸化、甲基化和泛素化 (1)。组蛋白甲基化是形成基因组的活跃和非活跃区域的主要决定因素，并且在发育期间基因组的正确编程过程中发挥关键作用 (2,3)。组蛋白 H3 (Arg2, 17, 26) 和 H4 (Arg3) 的精氨酸甲基化可促进转录激活，并由蛋白精氨酸甲基转移酶 (PRMTs) 家族介导，该家族包括辅助激活因子 PRMT1 和 CARM1 (PRMT4) (4)。与此相反，已确定更多样化的组蛋白赖氨酸甲基转移酶，除了其中某个外其余的都含有一个保守催化 SET 结构域，该结构域最初在果蝇 Su(var)3-9、zeste 增强子和 Trithorax 蛋白中得以确认。赖氨酸甲基化主要发生在组蛋白 H3 (Lys4 位点, 9, 27, 36, 79) 和 H4 (Lys20 位点) 中，并已确定与转录激活和沉默有关 (4)。这些赖氨酸残基的甲基化可协调染色质修饰酶的募集，这些酶含有甲基赖氨酸结合模块，例如克罗莫结构域 (HP1, PRC1)、PHD fingers (BPTF, ING2)、tudor 结构域 (53BP1) 和 WD-40 结构域 (WDR5) (5-8)。PADI4、LSD1、JMJD1、JMJD2 和 JHDM1 等组蛋白脱甲基酶的发现表明：甲基化是可逆的表观遗传标记物 (9)。

1. Peterson, C.L. and Laniel, M.A. (2004) Curr Biol 14, R546-51.
2. Kubicek, S. et al. (2006) Ernst Schering Res Found Workshop, 1-27.
3. Lin, W. and Dent, S.Y. (2006) Curr Opin Genet Dev 16, 137-42.
4. Lee, D.Y. et al. (2005) Endocr Rev 26, 147-70.
5. Daniel, J.A. et al. (2005) Cell Cycle 4, 919-26.
6. Shi, X. et al. (2006) Nature 442, 96-9.
7. Wysocka, J. et al. (2006) Nature 442, 86-90.
8. Wysocka, J. et al. (2005) Cell 121, 859-72.
9. Trojer, P. and Reinberg, D. (2006) Cell 125, 213-7.