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品牌 |
Roche |
基础属性 |
生产企业 |
Roche |
cas号 |
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规格 |
2 x 10000 units |
储存条件 |
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纯度 |
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密度 |
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本公司为ROCHE产品官方正式授权代理商。
产品描述
一般说明
特性:双链特异性核酸内切酶需要二价阳离子才能发挥最大活性。
活性:根据Kunitz(+ 25°C; DNA为底物),为10,000U /瓶。
单位定义:一个单位是酶活性,在测定条件下,每分钟吸光度增加0.001。
它是一种双链特异性内切核酸酶,二需要价阳离子激发最大活性。
应用
•DNase I(重组,I级)可用于:在蛋白质分离过程中消除DN A [1]
•染色质结构分析
•在样品制备过程中消除DNA [2]
特点和优点
内容物
冻干粉
单位定义
根据Kunitz,一个酶活力单位表示在测定条件下,在1ml中,导致260nm处的吸光度以0.001 / min的速率增加。体积活性是在0.1M乙酸钠,5 mM MgSO 4,pH 5.0条件下进行测定。
检测方法:将小牛胸腺DNA(100μg)与20至50U DNase I在+ 25°C下进行
探针。对260nm处吸光度的增加进行测定。
信息说明:由于Kunitz检测具有高重复性和灵敏度,因此根据Kunitz结构检测,选择这些条件用于活性测定。将该当酶用于正常实验目的时,公司罗氏建议使用适合特定应用的孵育缓冲液,例如,在标准文献中所提到的缓冲液的(Sambrook 等,Curr.Prot.Mol.Biol。等)。
准备说明
活化剂:该酶需要二价阳离子才能发挥最大活性。反应的特异性取决于所用阳离子的性质。在存在Mg 2+ DNase I 的情况下,会在dsDNA中引起单链缺口,而在存在Mn 2+的情况下,酶会产生双链断裂。
储存条件(工作溶液):溶解酶的长期储存
DNase I通常推荐的溶剂是水。当DNase I在水中重构时,该溶液可以在2至8°C下保存2天,并在-15至-20°C下保存1个月。为了获得最佳结果,请准备适当的等分试样,并避免反复冷冻和解冻。但是,要长期保存,请小心地将DNase I溶解在下面列出的一种缓冲液中。在缓冲液1中,酶将稳定数周。如果将其溶解在缓冲液2、3或4中并在建议的温度下储存,则该酶至少可以稳定18个月。
信息说明:溶解时请勿涡旋酶!
缓冲器1为:20mM Tris-HCL,20毫摩尔MgCl 2,5mM的氯化钙2,0.1 mM二硫赤藓糖醇,0.1 mM EDTA,50%(v / v)甘油,pH8。将该溶液储存在-15至-25°C;它不会在此温度下冻结,并且会稳定几个星期。
缓冲液2:20 mM Tris-HCl,50 mM NaCl,1 mM二硫赤藓糖醇,100μg/ mL BSA,50%甘油(v / v),pH 7.6。将此溶液在-15至-25°C下储存最多18个月;在此温度下它不会冻结。
缓冲器3为:20mM的Tris-HCl,1毫摩尔MgCl 2,50%(W / V)甘油,pH 7.5。将此溶液在-15至-25°C下储存最多18个月;在此温度下它不会冻结。
缓冲液4:20mM Tris-HCl,1mM MgCl 2,pH 7.5。等量的等分试样(例如,10μl),将等分试样在干冰上快速冷冻,并在-60°C或更低的温度下保存长达18个月。解冻每个实验所需的量。不要重新冻结。丢弃所有剩余的解冻溶液。
其他注意事项
仅用于生命科学研究。不用于诊断操作。
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