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品牌 | 阿拉丁 | |
基础属性 | 生产企业 | 上海阿拉丁生化科技股份有限公司 |
cas号 | ||
规格 | 750U | |
储存条件 | -20°C储存 | |
纯度 | ||
密度 |
中文名:T4 DNA Polymerase
英文名:T4 DNA Polymerase
货号:T665886-750U
包装:750U
存储温度:-20°C储存
产品介绍:
产品内容
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产品简介
本产品是由大肠杆菌表达,表达基因的来源为T4嗜菌体。由于T4 DNA聚合酶同时具有5’→3’ DNA聚合酶活性和3’→5’ DNA外切酶活性,可以用于将5’端突出末端补平或3’ 端突出末端削平,也可用于通过置换反应进行标记DNA探针合成、通过引物伸长法解析mRNA转录的起始点、定点突变过程中第二链的合成以及不依赖于连接反应的PCR产物克隆等。本T4 DNA聚合酶的3’→5’ DNA外切酶活性比Klenow Fragment要高约100-1,000倍, 且对于单链DNA要比双链DNA活性更高。本酶不含5’→3’DNA的外切核酸酶活性,于70℃ 加热10分钟可使其失活,金属离子螯合剂可以抑制其活性。
活性定义
以热变性小牛胸腺DNA为模板/引物,在37℃、pH8.8条件下,30分钟内使10 nmol
全核苷酸掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
质量控制
2 U的本酶和1 μg的Closed circular(RFI)pBR322 DNA在37℃下反应16小时, DNA的电泳谱带不发生变化。
使用方法
DNA 5’或3’突出末端平滑化:
1. 参考如下表格设置反应体系
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2. 按上表设置好反应体系后,轻轻混匀后离心沉淀液体。
3. 置于11℃反应20分钟,或室温(20-25℃)反应5分钟。
4. 70℃保温10分钟终止反应。
其他用途请自行参考T4 DNA Polymerase的相关文献资料进行。
注意事项
1. 本酶的最适pH为8-9,在pH7.5及pH9.7时活性约为50%。
2. 活性的表达需要Mg2+的存在。为了获得最大活性,还需要SH基的还原剂存在。
3. 整个反应体系中的离子强度超过100 mM时活性将被抑制。
4. 本酶易受模板DNA高级结构的影响,T4 gene 32产物可以显著提高聚合酶的活性, 而3’→5’的外切核酸酶活性则完全被抑制。
查看阿拉丁官网此产品相关对应页面:https://www.aladdin-e.com/zh_cn/T665886.html
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