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货号T665879-2500U
品牌阿拉丁
品牌类型自有品牌(制造商)
货期40天
-+
品牌 | 阿拉丁 | |
基础属性 | 生产企业 | 上海阿拉丁生化科技股份有限公司 |
cas号 | ||
规格 | 2500U | |
储存条件 | -20°C储存 | |
纯度 | ||
密度 |
中文名:T4 Polynucleotide Kinase
英文名:T4 Polynucleotide Kinase
货号:T665879-2500U
包装:2500U
存储温度:-20°C储存
产品介绍:
产品内容
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产品简介
T4 Polynucleotide Kinase简称T4 PNK,中文名称T4多聚核苷酸激酶,是由大肠杆菌表达,表达基因的来源为T4嗜菌体,可以催化磷酸在ATP的γ-位和寡核苷酸链(双链或单链DNA或RNA)的5’-羟基末端以及3’-单磷酸核苷间进行转移和交换,同时还具有3’ 磷酸酶活性,能将3’-磷酸基团从寡核苷酸的3’磷酸末端、脱氧3’-单磷酸核苷和脱氧3’-二磷酸核苷上水解掉。该T4多聚核苷酸激酶可用于寡核苷酸、DNA或RNA的5’末端标记或磷酸化;催化3’磷酸化的单核苷酸5’磷酸化以及去除3’端磷酸基团等。本品于75℃加热10 分钟可使其失活,加入EDTA也可使其失活,金属离子螯合剂、磷酸盐、铵根离子、大于50 mM的KCl和NaCl均可显著抑制其活性。
活性定义
37℃条件下,30分钟内,将转移ATP上1 nmolγ-磷酸基团转移到DNA 5’-OH末端所需的酶量定义为1个活性单位。
质量控制
经过多次柱纯化,SDS-PAGE检测其纯度大于99%;经检测无核酸内、外切酶、 磷酸酶和RNA酶活性的污染。
使用方法
DNA 5’末端磷酸化
1. 参考如下表格设置反应体系
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2. 按上表设置好反应体系后,轻轻混匀后离心沉淀液体。
3. 置于37℃孵育30分钟。
4. 加入1 μl 0.5 M / pH8.0的EDTA以终止反应。
DNA 5’末端标记
1. 参考如下表格设置反应体系
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2. 按上表设置好反应体系后,轻轻混匀后离心沉淀液体。
3. 置于37℃孵育30分钟。
4. 加入1 μl 0.5 M / pH8.0的EDTA以终止反应。
其他用途请自行参考相关文献资料进行。
注意事项
1. 由于铵盐可强烈抑制T4 Polynucleotide Kinase的活性,因此铵盐沉淀所得的DNA不能用于T4 Polynucleotide Kinase的标记反应。
2. PEG可促进磷酸化反应速率和效率,交换反应体系应加入PEG。
3. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
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