中文名：Bacterial Protein Extraction Kit

英文名：Bacterial Protein Extraction Kit

纯度：100 preps

货号：B665764-100T

包装：100T

存储温度：-20°C储存

产品介绍：

细菌蛋白抽提试剂使用温和的非离子型去污剂，适用于大肠杆菌及昆虫细胞表达的重组蛋白提取。提取过程中不需进行超声破碎，有效避免了外源蛋白的污染。本产品可应用于从细菌裂解液中提取可溶性蛋白。细菌蛋白抽提试剂盒在抽提试剂的基础上添加了溶菌酶、DNaseⅠ和蛋白酶抑制剂混合物，可提高蛋白提取效率并减轻因DNA引起的粘稠现象，有效避免蛋白降解。所提取的蛋白保持了生物学活性，可进行IP、Western blot、蛋白纯化等下游操作.

注意事项：

1．本产品适用于从新鲜或冻存细菌和昆虫细胞中提取蛋白。 

2．本品采用Tris缓冲系统，蛋白提取后的纯化操作，请使用相同的缓冲系统。 

3．使用本产品获得的蛋白裂解液，可用BCA或Bradford法进行蛋白定量。 

4．对于特殊的菌株，如果抽提效果不理想，可在抽提蛋白前冰冻样品。 

5．根据具体情况，可在本产品中加入蛋白酶抑制剂、盐、螯合剂、还原剂等。

操作步骤：

● 昆虫细胞蛋白提取 

1．低速离心收集细胞。每1 ml Bacterial Protein Extraction Reagent中加入10 μl Protease Inhibitor Cocktail即为1×工作液。 

2．称量细胞湿重，按10 ml/g的量加入1×工作液。

3．重悬后，冰上孵育20分钟（冰上放置时间应根据细胞类型不同进行调整）。 

4．15,000×g离心15分钟，分离可溶性蛋白。 

● 细菌可溶性蛋白提取 

1．5,000×g离心10分钟，收集菌体。 

2．可选步骤：每1 ml Bacterial Protein Extraction Reagent中加入1 μl DNase I（1,000 U/ml）、 2 μl Lysozyme（50 mg/ml）和10 μl Protease Inhibitor Cocktail，涡旋震荡混匀。 3．按照每克菌体沉淀加入20 ml Bacterial Protein Extraction Reagent的比例，向菌体沉 淀中加入抽提液，充分涡旋或用移液器上下吹打直至菌体完全重悬。

 4．重悬后，室温孵育10-15分钟（放置时间应根据细胞类型不同进行调整）。 

5．15,000×g离心5分钟。 

6．转移上清至新的离心管中（上清中即为可溶性蛋白），进行蛋白定量及下游实验。 

注意：如目的蛋白以包涵体形式存在，可使用包涵体蛋白溶解液进行溶解或优化表达 条件增加可溶性蛋白的表达。  

常见问题：

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